Análise qualitativa executando um teste de drogas

Para a maioria das substâncias proibidas no esporte profissional do resultado de prova positivo é bastante simples receber a confirmação da sua presença em uma amostra de urina. Como muitos métodos de proteção e obtenção de provas são baseados na aplicação de uma chromatography na combinação com a espectroscopia de massa, as recomendações da identificação de compostos químicos por meio de sistemas de GH-MS e ZhH-MS desenvolveram-se (/MS). A presença da substância considera-se inveterada se na representação relativa de certa quantidade de íons característicos (dependendo da espécie aplicada da espectrometria de massa) a amostra for comparável, considerando tolerâncias, com a amostra correspondente do padrão submetido à análise semelhante. Além disso, o tempo da dedução da substância não deve diferenciar-se (dentro de um intervalo admissível de um desvio) na análise hromatografic de uma amostra da urina do atleta e uma amostra de controle da urina que contém substância necessitada. Por isso, para a característica e a identificação de substâncias em amostras, tão difíceis para a análise, como a urina testa, a informação sobre valor sobre definição sobre o hromatografic e, especialmente, massa e parâmetros de espectrômetro dos compostos químicos estudados tem. As pesquisas numerosas da massa e as características de espectrômetro da estimulação ou disfarce de medicina conduzem-se por enquanto, e também os métodos da sua detecção para fins de executar um teste de drogas se desenvolvem (Masse et al., 1989; de Boer et al., 1991; Donike et al., 1995; Ayotte et al., 1996; Shackleton et al., 1997; Caramanchões, 1998; Aguilera et al., 1999; Thevis et al., 2000, 2001, 2002, 2003a).

Além disso consideraremos os princípios gerais da realização da análise de algumas destas substâncias.

Esteróides anabólicos

Considerando dados estatísticos acerca de resultados dos testes de doping fora transportados e classes das substâncias proibidas reveladas, é possível notar que muitas vezes como droga em esteróides de esteróide anabolizante de esporte se aplicam. Por exemplo, mais de 40% das substâncias proibidas encontradas pelos laboratórios acreditados pelo IOC em 2001 foram esteróides anabólicos. Um de representantes deste grupo é a testosterona derivada methyltestosterone, recebida pela substituição com o grupo metálico de um equilíbrio restante de hidrogênio em S-17. Os esteróides anabólicos na maioria implicam-se ativamente em processos metabólicos, formando como isso uma série de metabolites, por exemplo a recuperação de ketogroups, oxidação de grupos hydroxyl, um hydroxylation, e também oxidação/recuperação de carbono de comunicações — carbono em um núcleo de molécula de esteróide (Schanzer, 1996). Depois desta fase I do metabolismo e antes da alocação como uma parte da urina lá é a fase II de metabolismo, a saber a conjugação de produtos da fase I a glyukuropida ou sulfato.

A estratégia comumente aceita da identificação de metabolites de esteróides anabólicos é baseada na hidrólise enzymatic de metabolites da fase II durante a qual a fase I metabolites, a sua limpeza, a concentração, derivatization e a análise subsequente do GH-MS se formam. A maioria de metabolites de esteróides anabólicos, exceto nandrolon da qual será uma pergunta abaixo não é capaz para formar-se em um corpo humano do modo natural, por isso, em caso da detecção destas conexões na urina do atleta submetido a um teste de drogas que a mensagem no resultado de prova positivo se fará.

Esteróides projetados

O problema do uso dos assim chamados esteróides projetados (esteróide de desenhista) no esporte e no mundo científico acumula-se como uma avalancha depois em outubro de 2003 (Cavaleiro, 2003) o laboratório de um teste de drogas da universidade da Califórnia em Los Angeles achou o derivado de substância de gestrinon a preparação medicinal usado para o tratamento de um endometriosis. O resto de Ethynesilt localizado em 17o Carboneum desta obrigação leva à formação do hormônio de esteróide de tetragidrogestrinon (THG) que pode considerar-se como um análogo de um esteróide anabólico altamente eficaz de trenbolone, contudo as pesquisas clínicas da influência fisiológica e os efeitos de lado de THG nunca se executaram. A estratégia padrão de um teste de drogas em laboratórios de pesquisa que ainda se enviavam na detecção das drogas farmacêuticas que passaram testes clínicos parece ganhar obviamente insuficientemente para superar a aspiração de alguns atletas uma vitória caiu rivais fraudulentamente, pondo ao mesmo tempo em perigo a própria saúde. Considerando o fato que muitos procedimentos da proteção são baseados na comparação de amostras padrão com ensaios da urina com o uso de tais técnicas de uma espectrometria de massa como monitorização dos íons de jogo (monitorização de íon selecionada, SIM) ou monitorização de múltiplas reações (múltipla monitorização de reação, MRM), os derivados desconhecidos ou as preparações medicinais, como THG, são "invisíveis * para procedimentos ordinários do controle. Causa a necessidade do desenvolvimento de técnicas mais flexíveis do controle que permitiria descobrir tanto as substâncias conhecidas, como desconhecidas que possuem estrutura semelhante, por exemplo o núcleo de esteróide geral que em princípio é possível, especialmente, com o uso dos sistemas modernos GH-MS/MS. Você também pode gostar de Testalamin.

Esteróides endógenos

Se em caso da aplicação de esteróides anabólicos na urina houver metabolites que não se observam normais, o uso da testosterona como droga para achar muito mais difícil como este hormônio se produz em um corpo humano. Várias aproximações, a mais comum das quais são a determinação de uma proporção testosterona / epitestosteron (T/E) e assim chamada massa e medição de espectrômetro de uma proporção de isótopos estáveis de carbono (IRMS), desenvolveram-se com esta finalidade. O perfil de esteróides endógenos pode variar em várias situações (Geyer et al., 1996), contudo mostrou-se que a proporção Ò/Ý é um indicador fiável do uso da testosterona como droga como os produtos do epitestosterop ocorre independente da testosterona. Como limiar o valor da proporção Ò/Ý os 6 iguais aceitam-se, contudo em caso do excesso de um limiar o resultado de prova positivo registra-se não diretamente, o atleta deve passar a pesquisa adicional dirigida ao controle do nível de testosterona levantado natural.

O aumento na disponibilidade da análise de isótopo pelo método da espectrometria de massa (IRMS) fomentou a realização de várias pesquisas que mostraram uma possibilidade da detecção de distinções entre a testosterona endógena e sintética por meio desta aproximação. Especialmente, estabeleceu-se que a testosterona natural se diferencia dos análogos sintetizados do modo químico que se usam como recursos médicos baseados na proporção de isótopos de carbono, 3C/, 2C. A aplicação de GH com a combustão subsequente da substância analisada e a análise do gás carbônico formado ao mesmo tempo permite obter a informação sobre a origem de testosterona baseada nos isótopos isto sobre uma proporção |3C e, JC (Homing et al., 1998; Aguilera et al., 1999).

Diuréticos e beta2-agonists

Também os diuréticos e β2-àãîíèñòû pertencem a substâncias que a análise se faz normalmente por meio do GH-MS (/MS). Especialmente, o grupo de diuréticos caracteriza-se por uma variedade química da medicina nomeada com os objetivos semelhantes ou idênticos. Apele a representantes deste grupo de substâncias ionização principalmente negativa (Thieme et al., 2001; Thevis et al., 2002, 2003a) que se causa pelas suas propriedades ácidas, contudo para alguns diuréticos, em determinado triamteren, necessita-se ionização positiva. Para β2-àãîíèñòîâ a aproximação principal é a substância analisada com a detecção subsequente da molécula positivamente carregada. Como se descreve em "Métodos de análise", as fontes de íons que integram GH ao MS normalmente permitem gerar o protonated ou moléculas deprotoniron sem a sua fragmentação perceptível. Assim, a informação estrutural sobre as substâncias analisadas, especificidade e seletividade de analisadores de massa provê-se da aplicação da dissociação (a CANALHA) da medicina ionizada induzida por choques e a análise subsequente de fragmentos derivados. Com esta finalidade é necessário ter dados sobre a afinidade a prótons e comportamento de produtos da dissociação depois da ativação eficaz das moléculas analisadas por meio da CANALHA que significativamente dissente em mecanismos da fragmentação de moléculas do soco eletrônico (EI). Para diuréticos, e também para o volume β2-àãîíèñòîâ, exceto salbutamol a realização da análise de alta qualidade é bastante. Normalmente os hromatogramma dos íons extraídos fazem a detecção bastante sensível possível destas substâncias em testes biológicos, e a conclusão positiva sobre a sua disponibilidade tira-se por um direito de precedência a base da prevalência numérica essencial dos seus íons resultantes. Em 2001 aproximadamente 17,5% de casos de resultados positivos executados em 25 laboratórios de um teste de drogas acreditado pelo IOC pertenceram à aplicação β2-agonist, os diuréticos encontraram-se em 5% de casos.

Teste de drogas: análise quantitativa

Para algumas substâncias, inclusive stimulators, como ephedrine, metabolites de esteróides anabólicos, tal, como nandrolon e β2-agonists, como salbutamol, o nível liminar estabelece-se, baseado na comparação com a qual a conclusão sobre resultados de prova positivos ou negativos se tira. Várias razões tornaram-se a base de tal decisão. Ephedrines são uma parte de muita medicina antifria, por isso, antienvernizando regras a sua aplicação é legal se o conteúdo de derivados de norefedrin, ephedrine e pseudoephedrine na urina não exceder 5, 10 ou 25 mgs-ml' 1 respectivamente. Grupo de regalos de Salbutamol de simpatomimetik, é um de 4 permitidos do uso β2-àãîíèñòîâ (junto com salmeteroly, terbutaliny e formoteroly) na condição da sua aplicação na forma da inalação. Para determinar como a medicina se aplicou (oralno na forma de pastilhas ou na forma de um aerossol) e no que a dosagem, bastante difícil, durante as competições informa sobre a presença de salbutamol durante testes na federação relevante; se o conteúdo da substância excede 100 ng-ml '1. Durante o período entre competições o nível liminar de 1 mg-ml "1 como usando algum simpatomimetik nas doses os efeitos anabólicos terapêuticos significativamente excessivos observam-se estabelece-se. A presença de um metabolite de nandrolon 5a estrai Za ol 17 odin (norandrosterona) na urina de atletas profissionais pode causar-se até certo ponto por produtos endógenos, por isso, deste conteúdo liminar de substância 2 ig-ml*1 para homens e 5 ng-ml' 1 para mulheres estabelece-se. Por razões dos valores recebidos as pesquisas numerosas conduziram-se, vários fatores que podem influir no nível da formação endógena deste metabolite, por exemplo stress fisiológico considerável ou gravidez que levam ao aumento essencial no conteúdo desta substância na urina também se consideraram. A determinação quantitativa destas conexões executa-se com o uso de calibrar curvas que constroem baseado em resultados da determinação por métodos padrão dos padrões internos correspondentes que têm propriedades físicas e químicas semelhantes ou idênticas (Schanzer, Donike, 1995).

Conclusão

Executando um teste de drogas a análise de conexões baixas e moleculares baseia-se principalmente na aplicação de hromatografic e massa e métodos de espectrômetro que fazem a detecção possível e a identificação de drogas interditas e o seu metabolites em testes de líquidos biológicos, como sangue e urina. Enquanto em antigos anos a análise se executou principalmente por uma chromatography de gás com a detecção dos produtos divididos vários analisadores, por exemplo ardentes e ionização e descobridores de fósforo do nitrogênio, e também massa e espectrômetro analisadores. Nos últimos trabalhos geralmente a cromatografia líquida que produtos de separação depois da ionização com uma pressão atmosférica se expõem espectrômetro de massa à análise como esta aproximação permite reduzir significativamente o tempo da preparação de amostras aplica-se e não necessita um derivatization das substâncias analisadas. Além disso, graças à aplicação tripla de analisadores e implementação de capturas iônica da massa mais flexível e experimentos de espectrômetro dirigidos à determinação e a característica da medicina conhecida, e também as substâncias projetadas desconhecidas ficaram possíveis que também fomenta a fortificação da luta contra droga e uso ilegal de drogas interditas. Do momento da criação da lista das substâncias proibidas e os métodos da estimulação a variedade de substâncias às quais a atenção executando um teste de drogas se presta deixa de modificar-se e os laboratórios dentro deste processo dinâmico devem expandir-se e modificar constantemente métodos de análise, aumentando a sua sensibilidade, especificidade e adaptabilidade à solução de novas tarefas de limitar abusos da medicina no esporte, e também salvar atletas de suspeitas falsas. E aqui novos desenvolvimentos no campo de uma chromatography de alta velocidade e altamente eficaz, massa e espectrômetro, tendo alta resolução e sensibilidade, e também as aceitações modernas da ionização fornecem a laboratórios analíticos instrumentos valiosos que permitem obter até a informação mais detalhada sobre as substâncias aplicadas, por exemplo sobre a sua estrutura e metabolismo e estender períodos de tempo da identificação de abusos da medicina estimulante. Tanta medicina, como esteróides anabólicos, se aplica durante o período entre competições, mas ao mesmo tempo guarda o efeito estimulante durante várias semanas, o teste de drogas crescido necessita a realização de análises tanto durante as competições, como no fora do período de competição. Além disso, a especificidade máxima e a sensibilidade de procedimentos analíticos necessita-se.